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*,液相色譜系統(tǒng)是一種十分精密的設(shè)備,對結(jié)果的準(zhǔn)確性要求也很高,因此,我們在樣品制備的每一步都不可掉以輕心。正如液相色譜系統(tǒng)的說明書中所要求的,流動(dòng)相必須使用HPLC級的試劑,且使用前必須過濾。那么為什么要過濾?過濾什么?如何過濾呢?過濾流動(dòng)相需要注意什么?看如下詳解。
一、為什么要過濾?
流動(dòng)相過濾可以保護(hù)色譜系統(tǒng)和色譜柱,延長柱子的使用壽命,并且還能改善數(shù)據(jù)的度。更重要的是,過濾可以去除流動(dòng)相中的顆粒雜質(zhì),避免它們對內(nèi)部密封圈造成損害,或者造成小孔管道、層析柱、線內(nèi)過濾器及保護(hù)柱的堵塞。
二、用什么設(shè)備過濾?
一般建議使用專門的過濾器?;蛟S有人會(huì)說,過濾裝置那么貴,算了,買個(gè)砂芯漏斗得了。試問,儀器這么貴都買了,還在乎這點(diǎn)?專門的過濾器比起非專門的總是要差點(diǎn),專業(yè)的過濾器不僅簡單而且安全,例如pall公司的solvac流動(dòng)相過濾器。采用聚丙烯外殼,耐受強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、強(qiáng)腐蝕性有機(jī)溶劑。而磁性密封無需手動(dòng)擰緊,不用擔(dān)心漏液,也可避免膜移動(dòng)或撕裂的可能性。適合HLPC瓶、燒瓶和容器,讓你不再需要來回傾倒溶液。與玻璃漏斗或一次性杯子相比,腐蝕性溶劑溢灑的可能性要小。當(dāng)然,老板再也不擔(dān)心我打碎漏斗啦。
三、過濾流動(dòng)相需要注意什么
1、如何過濾?
SolVac流動(dòng)相過濾器的使用十分簡單,溶劑過濾器一般包括:三角積液瓶,砂心過濾頭,濾杯,固定夾,防塵蓋,膠管,膠管鏈接器。
使用步驟如下:
1) 先將砂芯過濾頭安裝于三角積液瓶上。
2) 取流動(dòng)相過濾膜放在砂芯過濾頭上,濾膜要*覆蓋砂芯區(qū)域。
3)用濾杯壓住濾膜,并用固定夾夾住砂芯過濾頭和濾杯上下法蘭邊。
4)用膠管連接溶劑過濾器和真空泵。
5)開啟真空泵,并將配置好的流動(dòng)相倒入濾杯中,注意不要太滿,流動(dòng)相過濾后到三角積液瓶中。
6)先拔下連接過濾器一端的膠管,然后再關(guān)閉真空泵。
7)過濾好的流動(dòng)相轉(zhuǎn)入溶劑瓶中,超聲脫氣20min以上后使用。
注意:過濾好的溶劑避免二次污染。
如下圖所示,依次放置好過濾器和管線,再啟動(dòng)真空泵即可開始過濾。
2、溶劑過濾器的清洗保養(yǎng)
使用過的溶劑過濾器要及時(shí)用純凈水沖洗凈。其中砂芯過濾頭不好直接清洗,可以按照過濾流動(dòng)相的步驟,依次抽濾異丙醇,純凈水來清洗砂芯內(nèi)部,清洗干凈后烘干備用。
3、怎樣選擇濾膜?
所有溶劑使用前都必須經(jīng)0.45µm(或0.22µm)濾膜濾過,以除去雜質(zhì)微粒,色譜純試劑也不例外。
0.22或0.45µm流動(dòng)相過濾膜(有機(jī)系/水系)
注意:用濾膜過濾時(shí),特別要注意分清有機(jī)相(脂溶性)濾膜和水相(水溶性)濾膜。
有機(jī)相濾膜一般用于過濾有機(jī)溶劑,過濾水溶液時(shí)流速低或?yàn)V不動(dòng)。水相濾膜只能用于過濾水溶液,嚴(yán)禁用于有機(jī)溶劑,否則濾膜會(huì)被溶解!溶有濾膜的溶劑不得用于HPLC。
注意:對于混合流動(dòng)相,只要含有機(jī)相,有機(jī)相濾膜過濾。
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